MCD
蛋氨酸和胆碱缺乏(MCD)饲料
非酒精性脂肪肝是一个常见的临床现象,包括从脂肪变性到非酒精性脂肪性肝炎(NASH),其后进展为肝纤维化,肝硬化和肝癌。目前用于NAFLD研究的动物模型主要有SD/Wistar大鼠和C57BL/6小鼠。胆碱缺乏饲料最常用于饮食伴有蛋氨酸和胆碱缺乏,或者高脂饮食伴有严重胆碱缺乏的研究,以及非酒精性脂肪肝的疾病模型构建。
MCD是广泛使用于大小鼠造非酒精性脂肪肝模型的氨基酸饲料。由于饲料中缺乏胆碱和可以转换成胆碱的蛋氨酸,肝脏内的脂肪不能正常地转运到血液中, 因此在肝脏细胞内和细胞间隙集聚形成脂滴,进而形成脂肪肝。MCD诱导非酒精性脂肪肝有造模快,效果猛的特点,可以在5周内形成比较明显的脂肪肝并发肝炎, 而后继续使用则形成肝纤维化,肝硬化。它的缺点是缺乏蛋氨酸,作为一种必需氨基酸,没有蛋氨酸就无法合成蛋白质,动物会逐渐消瘦。 MCD多用于诱导急性非酒精性脂肪肝。它的对照饲料即是蛋氨酸胆碱充足饲料MCS。
产品结构:氨基酸饲料的特点是用各种氨基酸来代替常规饲料中的酪蛋白供给生物体所需的蛋白质,从而实现对某种或多种氨基酸水平的精准控制。
蛋氨酸、胆碱不添加,含量为0,在已经发表的SCI论文中,蛋氨酸和胆碱缺乏一般采用0方式,即大多数情况下采用不含蛋氨酸和胆碱几乎为0的模型饲料,这种饲料用氨基酸替代蛋白质配制,属于氨基酸饲料。
MCD饲料能在短期内诱导脂肪性肝炎,并进展为肝纤维化,但是,MCD饲料同时也会导致啮齿类动物食欲下降从而引起体重减轻,且不发生胰岛素抵抗。这与人类典型的NASH患者情况相反。
小鼠喂养2-3周左右即可出现脂肪变性,5-8周左右建立NASH模型,因此,MCD饲料因成型快,病变发展快,重复性好成为研究NAFLD的由单纯性脂肪肝向NASH和肝纤维化进展最常用的饲料。
动物NAFLD模型判断标准
肝组织H&E染色,观察动物肝脏脂肪变性情况
血清生化指标:血清中谷丙转氨酶(ALT), 谷草转氨酶(AST),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG)水平显著升高。
对照组:MCS(MCD同源配方,增加蛋氨酸和胆碱)。
保存条件:模型饲料应当保存在0~4度。如果短期喂养(1个月内)则可以室温、阴凉处保存。
包装规格:2.5kg/盒,5kg(2.5kg*2盒)/箱、10kg(2.5kg*4盒)/箱。
注意:部分MCD饲料在储存过程中没有做冷藏避光处理,由于成分特性、会随着时间越来越黑(避光冷藏会减缓),这是一种成为美拉德反应的效果,实际不影响造模效果。
技术延伸:
非酒精性脂肪肝炎模型——蛋氨酸和胆碱缺乏(MCD)饲料
造模周期:4-6周
成模判定:① 肝组织HE染色,用10%的中性甲醛溶液固定肝脏组织,脱水、包埋后,进行常规HE染色。光学显微镜下,肝细胞脂肪变性占1/3以上且伴随炎症视为脂肪肝炎。
② 血清生化指标:检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆固醇(TC)、总三酰甘油(TG)的含量。
③ 生理学指标:肝指数=肝脏湿重(g)/体重(g)*100%.